J Clin Invest：揭示USP9X去泛素化ALDH1A3并维持GCSs的间充质特点

囊状母细胞膜瘤（GBM）是最常见和破坏持续性的人脑恶持续性，其特征在于较广的内异质持续性。尽管不太可能在多的系统病患方面获得了实质性，但GBM病人的结果仍然令人困惑。GBM拥有一个细胞膜亚群，统称GBM干细胞膜（GSCs），具自我备份活持续性和多向分化潜能以及在在控制能力。因此，迫切需要探寻针对GSC的新病患解决方案。并且，醛脱氢酶（ALDH）鸟嘌呤包含19种酶，它们将内源和外源醛代谢成相应的羧酸。ALDH1A3是主要的ALDH同工酶，参与人生殖细胞膜的各种生理过程。越来越多的证据表明，ALDH1A3在帕金森氏症干细胞膜（CSCs）之前展现出出高活持续性，并制约这些细胞膜内的各种生一物学特征。在GBM之前，已辨认出ALDH1A3作为保持外充质（MES）GSC的自我备份和致瘤持续性的关键小分子。然而，MES GSCs之前ALDH1A3失调的机制仍然是神秘的。2019年4同年8日，南京医科大学第一理学院王慧博设计团队等人在The Journal of Clinical Investigation上发表题为“USP9X deubiquitinates ALDH1A3and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells”的文章，辨认出USP9X是一种确实的DUB，可闭环ALDH1A3多谷胱甘肽化和稳定化。并且，USP9X是数据分析ALDH1A3hi MES GSCs富集的关键小分子，是MES GSCs自我备份和致瘤持续性所必需的。同时还评估了USP9X抑制对病人来源的MES GSC异种复制框架的潜在治果。为了相符ALDH1A3肽应该被谷胱甘肽 - 肽酶体控制系统（UPS）翻译后控制，深入研究人员首先使用放线菌酮（CHX）受阻肽质从头合成并HEK293T细胞膜和正常人星形囊状细胞膜（NHAs）之前的ALDH1A3肽质高水平。实际上，ALDH1A3在CHX执行的8小时内逐渐降解并几乎检测勉强。此外，用肽酶体类固醇MG-132执行细胞膜造成ALDH1A3肽高水平夙着降低。这些数据表明ALDH1A3通过UPS降解。接下来，深入研究人员寻求检验全权负责ALDH1A3稳定化的潜在DUB，并使用靶向HEK293T细胞膜之前的98DUB的siGENOMERTF漫画版来进行RNAi配对。该深入研究初始配对检验了与ALDH1A3理解无关的4个DUB（USP3，USP9X，USP22和OTUD1）。当这些DUB与HEK293细胞膜之前的ALDH1A3共理解时，辨认出只有USP9X需要与内源持续性ALDH1A3直接相互作用，从而其实USP9X是控制ALDH1A3稳定持续性的夙着候选一物。为了的测试这一点，将Flag标记的WT USP9X或催化反应失活的基因C1566A USP9X（在催化反应碱基的一个关键胆红素之前载有点突变）转染到HEK293T细胞膜之前。 WT USP9X而非C1566A基因的理解以mg依赖持续性方式则降低ALDH1A3肽高水平，表明USP9X以依赖于其DUB活持续性的方式则闭环ALDH1A3。囊状母细胞膜瘤（GBM）干细胞膜（GSC）的外充质（MES）亚型代表抗体膜亚群，其因其持续性摧残持续性和对正因如此药物的抗持续性而闻名于世。不太可能已提出醛脱氢酶1A3（ALDH1A3）作为保持GSC的MES特征的关键决定因素。然而，支持持续性ALDH1A3理解的机制仍然难以捉摸。在该深入研究之前，深入研究人员辨认出谷胱甘肽特异持续性肽酶9X（USP9X）是MES GSC之前ALDH1A3的确实去谷胱甘肽化酶。 USP9X与ALDH1A3相互作用，解聚并稳定化。此外，深入研究结果表明FACS分选的USP9Xhi细胞膜富集具高ALDH1A3活持续性和有效地致瘤控制能力的MES GSC。USP9X的消耗夙着大幅提高ALDH1A3，造成MES GSC的自我备份和致瘤控制能力的失掉，这可以通过ALDH1A3的异位理解得到很大程度的挽救。此外，深入研究人员还证明了USP9X类固醇WP1130作用于ALDH1A3降解并且在MES GSC共通的原位异种复制框架之前夙示出夙着的病患功效。另外，USP9X与原发持续性人GBM样品之前的ALDH1A3理解强烈无关，并且对于具MES亚组的病人具预后价值。总的来说，深入研究结果阐述了USP9X作为ALDH1A3肽稳定化的关键去谷胱甘肽化酶和GSC定向病患的潜在靶点。独有典故：Zhengxin Chen，et al.USP9X deubiquitinates ALDH1A3 and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells.J Clin Invest.April 8， 2019